Acta Scientiarum Polonorum

Czasopismo naukowe założone w 2001 roku przez polskie uczelnie rolnicze

| Informacje | Recenzenci | Rada Programowa | Rady naukowe | Adresy redakcji | Serie | Wymogi edytorskie | Wzorcowy artykuł | Warunki publikacji | Procedura recenzowania | Prenumerata | Streszczenia | Szukaj | Statystyki |
Administratio Locorum
(Gospodarka Przestrzenna) 16 (1-4) 2017     ISSN: 1644-0741
Tytuł
RÓŻNICOWANIE SUC+ TRANSFORMANTÓW DROŻDŻY YARROWIA LIPOLYTICA
Autor
Ewa Walczak-Chajec, Stephan Mauersberger, Małgorzata Robak
Słowa kluczowe
metody molekularne, drożdże, transformacja, selekcja, RAPD, PCR
Streszczenie
Stosując inżynierię genetyczną w celu ulepszania szczepów drożdży, często konieczne jest rozróżnienie otrzymanych transformantów. Celem badań było wykorzystanie kompilacji techniki RAPD-PCR prowadzonej z czterema mikrosatelitarnymi starterami: (GTG)5 , (GAC)5 , (GACA)4 i M13 oraz analizy filogenetycznej do różnicowania szczepów drożdży Yarrowia lipolytica otrzymanych w wyniku homologicznej lub heterologicznej transformacji transgenem obejmującym gen SUC2 z Saccharomyces cerevisiae pod kontrolą promotora XPR2 i oskrzydlonym fragmentami genu URA3 z Y. lipolytica. W przypadku kilku transformantów obecność genu SUC2 potwierdzono PCR z wykorzystaniem specyficznych starterów i sondy genetycznej. Analizę filogenetyczną 20 badanych szczepów wykonano na podstawie zbiorczego dendrogramu, przygotowanego według matryc podobieństwa otrzymanych z wyników reakcji RAPD-PCR. Zastosowana technika badawcza (z jednym wyjątkiem) umożliwiła zgrupowanie homologicznych i heterologicznych transformantów w dwa oddzielne klady o podobieństwie 79%. Do grupy pierwszej zaliczono szczep rodzicielski Y. lipolytica A-101 oraz 10 z 11 klonów o fenotypie Suc+Ura+ (B56-5, B60-4, B14-6, B10A-5, B7-6, B59-3, KLON1, KLON10, B58-2, B61-5). Drugą grupę (z wyjątkiem szczepu B62-1 o fenotypie Suc+Ura+) tworzyły klony homologicznej integracji o fenotypie Ura niezależnie od cechy Suc (o fenotypie Suc+: B54-6, A18, B55-3, B57-4 oraz Suc-: B1-1, B9-2, A50).
Strony
71-84
Cytowanie
Walczak-Chajec, E., Mauersberger, S., Robak, M. (2017). RÓŻNICOWANIE SUC+ TRANSFORMANTÓW DROŻDŻY YARROWIA LIPOLYTICA. Acta Sci. Pol. Biotechnol., 16(1-4), 71-84.
Pełny tekst